申请实习证 两公律师考核申请 网上投稿 《上海律师》
当前位置: 首页 >> 业务研究 >> 业务研究会 >> 并购重组业务研究委员会 >> 专业论文

《农业用基因编辑植物安全评价指南(试行)》评析

    日期:2022-05-19     作者:邓学敏(并购重组业务研究委员会、北京炜衡(上海)律师事务所)、饶梦莹(北京炜衡(上海)律师事务所)

2022124日,农业农村部出台《农业用基因编辑植物安全评价指南(试行)》(以下简称《安全评价指南》),正式拉开了我国基因编辑技术的立法序幕。指南首次在规范层面明确了农业用基因编辑植物的监管要求,标志着我国基因编辑技术应用进入了新时代。

基因编辑作为近年来最受瞩目的科学领域之一,于202010月被授予诺贝尔化学奖。其在农作物育种领域产生了革命性影响,可以安全、高效、精准地实现作物性状改良,为提高粮食产量、改善人民健康带来了前所未有的历史机遇[1]。世界范围内,基因编辑产品的研发发展迅猛,相应的法律规范亦在陆续出台。

为解决我国粮食安全问题,抢占农业科技发展赛道,20213月,《中华人民共和国国民经济和社会发展第十四个五年规划和2035年远景目标纲要》在强化国家战略科技力量一章中,指出要瞄准生物育种等前沿领域,实施一批具有前瞻性、战略性的国家重大科技项目。202112月,农业农村部发布《十四五全国农业农村科技发展规划》,明确指出要把高水平农业科技自立自强作为农业农村发展的战略支撑,突出基因编辑等重点领域,挖掘粮食作物增产潜力,确保国家粮食安全;开展基因编辑技术原始创新,研发新型基因编辑工具。

在此背景之下,备受期待的《安全评价指南》应运而生,为我国农作物基因编辑植物的研发、应用提供了相应政策支持。本文将对指南的具体内容及其影响进行分析、探讨。

一、基因编辑的概念

根据《安全评价指南》,农业用基因编辑植物,是指利用基因工程技术对基因组特定位点进行靶向修饰获得的、用于农业生产或农产品加工的植物及其产品。由此推知,基因编辑是指利用基因工程技术对生物体基因组特定位点进行靶向修饰。这是规范层面首次对基因编辑作出解释。

二、农业用基因编辑植物的监管要求

(一)监管思路的变化

《安全评价指南》的出台,是规范层面首次将基因编辑的概念从转基因中剥离出来,对二者进行区分监管。

长期以来,我国将转基因定义为利用基因工程技术改变基因组构成,该等概念的范围显然较为广泛,将基因编辑亦涵盖其中。

但结合《转基因植物安全评价指南》的内容可知,我国对转基因植物的监管,限于引入外源基因的植物。而基因编辑植物与转基因植物的区别就在于,绝大多数情形下,基因编辑并不会引入外源基因,仅发生原有基因功能的改变,使其符合人类相应需求。因其化学变异和基因修复过程在自然界中也可能发生,则此类基因编辑技术不属于传统转基因技术,获得的食品与利用传统育种技术获得的食品安全性等同[2],近年来,包括美国、日本在内的部分国家,对此类基因编辑植物采取了相对宽松的监管政策。而对引入外源基因的基因编辑植物,仍普遍根据转基因植物的标准管理。

基于此,根据基因编辑技术是否引入外源基因及其风险程度,《安全评价指南》就农业用基因编辑植物制定了特殊的监管规则。这既是基于推动农业科技发展、保障国家粮食安全的战略考量,亦是世界范围内对基因编辑生物进行分类监管的大势所趋,具有相当的积极意义。

(二)具体监管要求

1.安全评价申报流程

根据基因编辑技术是否引入外源基因及其风险程度,《安全评价指南》制订了相应的安全评价申报流程。总体规则如下:

1)引入外源基因的基因编辑植物,须按照《转基因植物安全评价指南》要求申报安全评价。

2)未引入外源基因的基因编辑植物,依据在环境安全和食用安全方面可能产生的风险申报安全评价。主要包括:

目标性状增加环境安全和食用安全风险的基因编辑植物,中间试验后,可申请生产应用安全证书。

目标性状可能增加食用安全风险的基因编辑植物,中间试验后,可申请生产应用安全证书,但需要提供食用安全数据资料。

目标性状可能增加环境安全风险的基因编辑植物,需要在中间试验后开展环境释放或生产性试验,积累环境安全数据资料后,申请生产应用安全证书。

目标性状可能增加环境安全和食用安全风险的基因编辑植物,需要在中间试验后开展环境释放或生产性试验,积累环境安全和食用安全数据资料后,申请生产应用安全证书。

需注意的是,《安全评价指南》未就申请实验研究阶段作出具体规定,我们理解,该阶段需参照《转基因植物安全评价指南》进行。

相较于转基因生物安全评价申报流程,《安全评价指南》整体缩短了农业用基因编辑植物的申报流程,这对推动农业用基因编辑植物的研发及产业化有着重要作用。二者具体差异如下: 

2.其他监管要求

在上述规定之外,《安全评价指南》还提出了以下监管要求

1)中外合作、合资或者外方独资在中华人民共和国境内从事基因编辑植物研究与试验的,应当在实验研究开始前申请。申请基因编辑植物实验研究的,一份申报书只能包含同一物种的靶标植物和相同的目标性状,实验年限一般为12年。

2)首次申请生产性试验或安全证书的,应提供所申报基因编辑植物样品、对照样品及检测方法。

3)农业农村部收到安全证书申请后,应当委托具备检测条件和能力的技术检测机构进行检测。

三、相关重要问题评述

(一)《安全评价指南》的效力范围

从适用范围来看,尽管《安全评价指南》首次明确了基因编辑的概念,但适用范围有限,仅包括农业用基因编辑植物,不适用于基因编辑动物、微生物等等。

此外,从监管环节来看,《安全评价指南》仅规定了农业用基因编辑植物申报安全评价的监管要求,并不涉及其他环节的监管,如生产、加工、经营等等。这也意味着,目前,农业用基因编辑植物取得安全证书后,仍需按照《农业转基因生物安全管理条例》和《农业转基因生物安全评价管理办法》(以下合称转基因规范)等规范的规定,履行后续环节的监管要求。

(二)《安全评价指南》的效力层级

《安全评价指南》是农业农村部制定并发布的规范性文件,其效力层级低于《农业转基因生物安全管理条例》和《农业转基因生物安全评价管理办法》等行政法规、部门规章,且不可与转基因规范的规定冲突。

而转基因规范尚未对农业转基因生物的定义进行修订,亦未明确区分基因编辑的概念。这也意味着,目前我国对基因编辑植物的监管,仍在农业转基因生物的监管框架下进行。

(三)后续规范体系的完善

在基因编辑领域,《安全评价指南》采取了实用主义的立法思路,其顺应我国保障粮食安全的战略要求,在农业用基因编辑领域先行先试,优先解决了其在安全评价申报流程的痛点问题。指南的出台,将加速我国农业用基因编辑植物的产业转化,有利于我国抢占基因编辑发展赛道。

但如前所述,鉴于基因编辑与转基因存在明显区别,且基因编辑较后者有着明显优势,故对二者的分类管理是大势所趋。后续,基因编辑的概念及监管要求仍有待进一步厘清,在相关规范运作成熟后,可适时另行制订或修订更高位阶的法律规范,从而逐步形成基因编辑和转基因的分类监管规范体系。

注:在安全评价申报材料上,《安全评价指南》作了大幅调整,需予以关注。我们对各类基因编辑植物安全评价申报材料作了总结,方便读者了解相关申报要求。此外,我们也对基因编辑植物(以可能增加环境安全和食用安全风险为例)与转基因植物的安全评价申报材料作了对比,以帮助读者快速了解相关差异。具体总结详见文末附件一、附件二。


附件一:各类基因编辑植物安全评价申报材料

 

 

目标性状不增加环境安全和食用安全风险的基因编辑植物

目标性状可能增加食用安全风险的基因编辑植物

目标性状可能增加环境安全风险的基因编辑植物

目标性状可能增加环境安全和食用安全风险的基因编辑植物

总体要求

分子特征

1.靶基因相关资料

详细描述靶基因的结构、功能、代谢(调控)途径和安全性。

结构:完整的DNA序列和推导的氨基酸序列,在染色体上的位置和拷贝数等。

功能:生物学功能及性状。例如抗旱。

代谢(调控)途径:靶基因编码产物是酶的,提供其代谢底物、产物和可能影响的相关代谢途径等资料;靶基因编码产物是调控因子的,提供其可能影响的调控网络、信号通路等资料;靶基因编码产物是其它类型蛋白质的,说明其功能及作用机理。

安全性:从基因结构、功能、代谢(调控)途径及有关安全性资料等方面综合评价靶基因修饰对安全性的影响。

2.基因编辑方法相关资料

1)基因编辑工具:提供基因编辑工具的名称、类型和特性。

2)载体构建的物理图谱:详细注明基因编辑载体所有元件名称、位置和酶切位点。

3)基因编辑载体的元件:详细描述基因编辑载体所有元件的来源(如人工合成或供体生物名称)、名称、大小、DNARNA)序列、功能、安全应用记录等。

4)基因编辑方法和流程:详细描述试验设计、操作流程和筛选过程等。

3.靶基因编辑情况

1)提供基因编辑导致的靶基因或(和)靶蛋白变化情况的数据资料,包括试验方法、数据质量、分析方法、分析结论等。

2)提供基因编辑植物的特异性检测数据,包括试验方法、数据质量、分析方法、分析结论等。

4.载体序列残留情况

分析载体序列残留的情况(含骨架序列、主要元件等),包括试验方法、数据质量、分析方法、分析结论等。

5.脱靶情况

分析基因编辑脱靶情况,包括试验方法、数据质量、分析方法、分析结论等。

遗传稳定性

1.靶基因编辑的稳定性

检测靶基因的编辑位点以及靶基因在植物不同世代的编辑情况,提供不少于3代的试验数据。

2.目标性状表现的稳定性

考察目标性状在植物不同世代的表现情况,提供不少于3代的试验数据。

环境安全

提供不增加环境安全风险的分析数据或资料

提供不增加环境安全风险的分析数据或资料

参照《转基因植物安全评价指南》提供环境安全数据资料

参照《转基因植物安全评价指南》提供环境安全数据资料

食用安全

提供不增加食用安全风险的分析数据或资料

参照《转基因植物安全评价指南》提供食用安全数据资料

提供不增加食用安全风险的分析数据或资料

参照《转基因植物安全评价指南》提供食用安全数据资料

阶段要求

申请实验研究

本次新规未作具体规定,我们理解,需参照《转基因植物安全评价指南》进行

申请中间试验

1.提供靶基因和基因编辑方法的相关资料。

2.提供每一个基因编辑材料自交或杂交代别,及靶基因变化情况的数据资料。

3.提供载体序列PCR检测的资料。

4.提供脱靶情况的生物信息学分析资料。

申请环境释放或生产性试验

/

/

1)申请中间试验提供的相关资料,以及中间试验结果的总结报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物至少2代的遗传稳定性资料,包括靶基因编辑的稳定性和目标性状表现的稳定性。

4)提供目标性状和功能效率的评价资料。

5)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

6)提供环境安全评价试验方案。

1)申请中间试验提供的相关资料,以及中间试验结果的总结报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物至少2代的遗传稳定性资料,包括靶基因编辑的稳定性和目标性状表现的稳定性。

4)提供目标性状和功能效率的评价资料。

5)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

6)提供环境安全评价和食用安全评价试验方案。

申请安全证书

类型1

生产应用

1)汇总实验研究和中间试验阶段的资料,提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物至少3代的遗传稳定性资料,包括靶基因编辑的稳定性和目标性状表现的稳定性。

4)提供目标性状和功能效率的评价资料。

5)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

6)提供不增加环境安全风险和食用安全风险的分析数据或资料。

1)汇总实验研究和中间试验阶段的资料,提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物至少3代的遗传稳定性资料,包括靶基因编辑的稳定性和目标性状表现的稳定性。

4)提供目标性状和功能效率的评价资料。

5)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

6)提供食用安全评价数据资料。

7)提供不增加环境安全风险的分析数据或资料。

1)汇总以往各试验阶段的资料,提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物至少3代的遗传稳定性资料,包括靶基因编辑的稳定性和目标性状表现的稳定性。

3)提供目标性状和功能效率的评价资料。

4)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

5)提供环境安全评价数据资料。

6)提供不增加食用安全风险的分析数据或资料。

1)汇总以往各试验阶段的资料,提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物至少3代的遗传稳定性资料,包括靶基因编辑的稳定性和目标性状表现的稳定性。

3)提供目标性状和功能效率的评价资料。

4)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

5)提供环境安全评价和食用安全评价数据资料。

类型2

进口用作加工原料

1)提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

4)提供不增加环境安全风险和食用安全风险的分析数据或资料。

5)输出国家或者地区经过科学试验证明对人类、动植物、微生物和生态环境无害的资料。

1)提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

4)提供食用安全评价数据资料。

5)提供不增加环境安全风险的分析数据或资料。

6)输出国家或者地区经过科学试验证明对人类、动植物、微生物和生态环境无害的资料。

1)提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

4)提供环境安全评价数据资料。

5)提供不增加食用安全风险的分析数据或资料。

6)输出国家或者地区经过科学试验证明对人类、动植物、微生物和生态环境无害的资料。

1)提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

4)提供环境安全评价和食用安全评价数据资料。

5)输出国家或者地区经过科学试验证明对人类、动植物、微生物和生态环境无害的资料。


附件二:基因编辑植物(以可能增加环境安全和食用安全风险为例)与转基因植物的安全评价申报材料对比

 

 

目标性状可能增加环境安全和食用安全风险的基因编辑植物

农业转基因植物

总体要求

分子特征

1.靶基因相关资料

详细描述靶基因的结构、功能、代谢(调控)途径和安全性。

结构:完整的DNA序列和推导的氨基酸序列,在染色体上的位置和拷贝数等。

功能:生物学功能及性状。例如抗旱。

代谢(调控)途径:靶基因编码产物是酶的,提供其代谢底物、产物和可能影响的相关代谢途径等资料;靶基因编码产物是调控因子的,提供其可能影响的调控网络、信号通路等资料;靶基因编码产物是其它类型蛋白质的,说明其功能及作用机理。

安全性:从基因结构、功能、代谢(调控)途径及有关安全性资料等方面综合评价靶基因修饰对安全性的影响。

2.基因编辑方法相关资料

1)基因编辑工具:提供基因编辑工具的名称、类型和特性。

2)载体构建的物理图谱:详细注明基因编辑载体所有元件名称、位置和酶切位点。

3)基因编辑载体的元件:详细描述基因编辑载体所有元件的来源(如人工合成或供体生物名称)、名称、大小、DNARNA)序列、功能、安全应用记录等.

4)基因编辑方法和流程:详细描述试验设计、操作流程和筛选过程等。

3.靶基因编辑情况

1)提供基因编辑导致的靶基因或(和)靶蛋白变化情况的数据资料,包括试验方法、数据质量、分析方法、分析结论等。

2)提供基因编辑植物的特异性检测数据,包括试验方法、数据质量、分析方法、分析结论等。

4.载体序列残留情况

分析载体序列残留的情况(含骨架序列、主要元件等),包括试验方法、数据质量、分析方法、分析结论等。

5.脱靶情况

分析基因编辑脱靶情况,包括试验方法、数据质量、分析方法、分析结论等。

从基因水平、转录水平和翻译水平,考察外源插入序列的整合和表达情况。

1.表达载体相关资料

1)载体构建的物理图谱

详细注明表达载体所有元件名称、位置和酶切位点。

2)目的基因

详细描述目的基因的供体生物、结构(包括基因中的酶切位点)、功能和安全性。

供体生物:如Bt基因crylA来源于苏云金芽血杆菌XX菌株。

结构:完整的DNA序列和推导的氨基酸序列。

功能:生物学功能及性状,如抗鳞翅目昆虫。

安全性:从供体生物特性、安全使用历史、基因结构、功能及有关安全性试验数据等方面综合评价目的基因的安全性。

3)其他主要元件

启动子:供体生物来源、大小、DNA序列(或文献)、功能、安全应用记录。

终止子:供体生物来源、大小、DNA序列(或文献)、功能、安全应用记录。

标记基因:供体生物来源、大小、DNA序列(或文献)、功能、安全应用记录。

报告基因:供体生物来源、大小、DNA序列(或文献)、功能、安全应用记录。

其他序列:来源(如人工合成或供体生物名称)、名称、大小、 DNA序列(或文献)、功能、安全应用记录。

2.目的基因在植物基因组中的整合情况

釆用转化体特异性PCRSouthern杂交等方法,分析外源插入序列在植物基因组中的整合情况,包括目的基因和标记基因的拷贝数,标记基因、报告基因或其它调控序列删除情况,整合位点等。

外源插入序列的转化体特异性PCR检测:具有序列名称、引物序列、扩增产物长度、PCR条件、扩增产物电泳图谱(含图题、分子量标准、阴性对照、阳性对照、泳道标注)。

外源插入序列的Southern杂交:釆用两种以上限制性内切酶分别消化植物基因组总DNA,获得能明确整合拷贝数的、具有转化体特异性的分子杂交图谱。文字描述至少包括探针序列位置、内切酶名称、特异性条带的大小、图题、分子量标准、阴性对照、阳性对照、泳道标注。

外源插入序列的全长DNA序列:实际插入受体植物基因组的全长DNA序列和插入位点的两端边界序列(大于300bp)。提供转化体特异性PCR验证时相应引物名称、序列及其扩增产物长度。

3.外源插入序列的表达情况

1)转录水平表达(RNA

釆用Real-time PCR, RT-PCRNorthern杂交等方法,分析主要插入序列(如目的基因、标记基因等)的转录表达情况,包括表达的主要组织和器官(如根、茎、叶、果实、种子等)。

RT-PCR检测:引物序列、扩增产物长度、RT-PCR条件、扩增产物电泳图谱(含图题、分子量标准、阴性对照、阳性对照、泳道标注)。

Northern杂交:探针序列位置、特异性条带的大小、Northern杂交条件、杂交图谱(含图题、分子量标准、阴性对照、阳性对照、泳道标注)。

2)翻译水平表达(蛋白质)

釆用ELISAWestern杂交等方法,分析主要插入序列(如目的基因、标记基因等)的蛋白质表达情况,包括表达的主要组织和器官(如根、茎、叶、种子等)。

ELISA检测:描述定量检测的具体方法,包括相关抗体、阴性对照、阳性对照、光密度测定结果、标准曲线等。

Western免疫印记:相关抗体名称、特异性蛋白条带的大小、Western免疫印记条件、免疫印记图谱(含图题、分子量标准、阴性对照、阳性对照、泳道标注、样品和阳性对照的加样量)。

遗传稳定性

1.靶基因编辑的稳定性

检测靶基因的编辑位点以及靶基因在植物不同世代的编辑情况,提供不少于3代的试验数据。

2.目标性状表现的稳定性

考察目标性状在植物不同世代的表现情况,提供不少于3代的试验数据。

1.目的基因整合的稳定性

Southern或转化体特异性PCR手段检测目的基因在转化体中的整合情况,明确转化体中目的基因的拷贝数以及在后代中的分离情况,提供不少于3代的试验数据。

2.目的基因表达的稳定性

Northern, Real-time PCR, RT-PCR, Western 等手段提供目的基因在转化体不同世代在转录(RNA)和(或)翻译(蛋白质)水平表达的稳定性(包括不同发育阶段和不同器官部位的表达情况),提供不少于3代的试验数据。

3.目标性状表现的稳定性

用适宜的观察手段考察目标性状在转化体不同世代的表现情况,提供不少于3代的试验数据。

环境安全

参照《转基因植物安全评价指南》提供环境安全数据资料

1.生存竞争能力

提供与受体或亲本植物比较,转基因植物种子数量、重量、活力和休眠性,越冬越夏能力,抗病虫能力,生长势,生育期,落粒性,自生苗等试验数据和结论。

若受体植物为多年生(如饲草、制种用的草坪草)、无性繁殖或目标性状增强生存竞争力(如抗旱、耐盐等),应根据个案分析的原则提出有针对性的补充资料。

2.基因漂移的环境影响

(1)受体物种的相关资料

如果存在可交配的野生近缘种,提供野生近缘种的地理分布范围、发生频率、生物学特性(生育期、生长习性、开花期、繁殖习性、种子及无性繁殖器官的传播途径等)以及与野生近缘种的亲缘关系(包括基因组类型、与栽培种的天然异交结实性、杂种F1的育性及其后代的生存能力和结实能力)的资料。

如果存在同一物种的可交配植物类型,需提供同一物种植物类型的分布及其危害情况的资料。

(2)外源基因漂移风险

对于存在可交配的野生近缘种或存在同一物种可交配的植物类型,无相关数据和资料的,可设计试验评估外源基因漂移风险及可能造成的生态后果,如基因漂移频率、外源基因在野生近缘种中表达情况、目的基因是否改变野生近缘种的生态适合度等试验。

3.功能效率评价

提供转基因植物的功能效率评价报告。如为有害生物抗性转基因植物,则需要提供对靶标生物的抗性效率试验数据。

抗性效率指抗有害生物转基因植物所产生的抗性物质对靶标生物综合作用的结果,一般通过转基因品种与受体品种在靶标生物数量变化、危害程度、植物长势及产量等方面的差别进行评价。抗病虫转基因植物需提供在室内和田间试验条件下,转基因植物对靶标生物的抗性生测报告、靶标生物在转基因品种及受体品种田季节性发生危害情况和种群动态的试验数据与结论。

4.有害生物抗性转基因植物对非靶标生物的影响

根据转基因植物与外源基因表达蛋白特点和作用机制,有选择地提供对相关非靶标植食性生物、有益生物(如天敌昆虫、资源昆虫和传粉昆虫等)、受保护的物种等潜在影响的评估报告。

5.对生态系统群落结构和有害生物地位演化的影响

根据转基因植物与外源基因表达蛋白的特异性和作用机理, 有选择地提供对相关动物群落、植物群落和微生物群落结构和多样性的影响,以及转基因植物生态系统下病虫害等有害生物地位演化的风险评估报告等。

6.靶标生物的抗性风险

靶标生物的抗性是指靶标生物由于连续多代取食转基因植物,敏感个体被淘汰,抗性较强的个体存活、繁殖,逐渐发展成高抗性种群的现象。抗病虫转基因植物需提供对靶标生物的作用机制和特点等资料,转基因植物商业化种植前靶标生物的敏感性基线数据,抗性风险评估依据和结论,拟釆取的抗性监测方案和治理措施等。

食用安全

参照《转基因植物安全评价指南》提供食用安全数据资料。

按照个案分析的原则,评价转基因植物与非转基因植物的相对安全性。

传统非转基因对照物选择:无性繁殖的转基因植物,以非转基因植物亲本为对照物;有性繁殖的转基因植物,以遗传背景与转基因植物有可比性的非转基因植物为对照物。对照物与转基因植物的种植环境(时间和地点)应具有可比性。

1.新表达物质毒理学评价

1)新表达蛋白质资料

提供新表达蛋白质(包括目的基因和标记基因所表达的蛋白质)的分子和生化特征等信息,包括分子量、氨基酸序列、翻译后的修饰、功能叙述等资料。表达的产物若为酶,应提供酶活性、酶活性影响因素(如pH温度、离子强度)、底物特异性、反应产物等。

提供新表达蛋白质与已知毒蛋白质和抗营养因子(如蛋白酶抑制剂、植物凝集素等)氨基酸序列相似性比较的资料。

提供新表达蛋白质热稳定性试验资料,体外模拟胃液蛋白消化稳定性试验资料,必要时提供加工过程(热、加工方式)对其影响的资料。

若用体外表达的蛋白质作为安全性评价的试验材料,需提供体外表达蛋白质与植物中新表达蛋白质等同性分析(如分子量、蛋白测序、免疫原性、蛋白活性等)的资料。

2)新表达蛋白质毒理学试验

当新表达蛋白质无安全食用历史,安全性资料不足时,必须提供经口急性毒性资料,28天喂养试验毒理学资料视该蛋白质在植物中的表达水平和人群可能摄入水平而定,必要时应进行免疫毒性检测评价。如果不提供新表达蛋白质的经口急性毒性和28天喂养试验资料,则应说明理由。

3)新表达非蛋白质物质的评价

新表达的物质为非蛋白质,如脂肪、碳水化合物、核酸、维生素及其它成分等,其毒理学评价可能包括毒物代谢动力学、遗传毒性、亚慢性毒性、慢性毒性/致癌性、生殖发育毒性等方面。具体需进行哪些毒理学试验,釆取个案分析的原则。

4)摄入量估算

应提供外源基因表达物质在植物可食部位的表达量,根据典型人群的食物消费量,估算人群最大可能摄入水平,包括同类转基因植物总的摄入水平、摄入频率等信息。进行摄入量评估时需考虑加工过程对转基因表达物质含量的影响,并应提供表达蛋白质的测定方法。

2.致敏性评价

外源基因插入产生新蛋白质,或改变代谢途径产生新蛋白质的,应对该蛋白质的致敏性进行评价。

提供基因供体是否含有致敏原、插入基因是否编码致敏原、新蛋白质在植物食用和饲用部位表达量的资料。

提供新表达蛋白质与已知致敏原氨基酸序列的同源性分析比较资料。

提供新表达蛋白质热稳定性试验资料,体外模拟胃液蛋白消化稳定性试验资料。

对于供体含有致敏原的,或新蛋白质与已知致敏原具有序列同源性的,应提供与已知致敏原为抗体的血清学试验资料。

受体植物本身含有致敏原的,应提供致敏原成分含量分析的资料。

3.关键成分分析

提供受试物基本信息,包括名称、来源、所转基因和转基因性状、种植时间、地点和特异气候条件、储藏条件等资料。受试物应为转基因植物可食部位的初级农产品,如大豆、玉米、棉籽、水稻种子等。同一种植地点至少三批不同种植时间的样品,或三个不同种植地点的样品。

提供同一物种对照物各关键成分的天然变异阀值及文献资料等。

(1)营养素。包括蛋白质、脂肪、碳水化合物、纤维素、矿物质、维生素等,必要时提供蛋白质中氨基酸和脂肪中饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸含量分析的资料。矿物质和维生素的测定应选择在该植物中具有显著营养意义或对人群营养素摄入水平贡献较大的矿物质和维生素进行测定。

(2)天然毒素及有害物质。植物中对健康可能有影响的天然存在的有害物质,根据不同植物进行不同的毒素分析,如棉籽中棉酚、油菜籽中硫代葡萄糖忒和芥酸等。

(3)抗营养因子。对营养素的吸收和利用有影响、对消化酶有抑制作用的一类物质。如大豆胰蛋白酶抑制剂、大豆凝集素、大豆寡糖等;玉米中植酸;油菜籽中单宁等。

(4)其他成分。如水分、灰分、植物中的其他固有成分。

(5)非预期成分。因转入外源基因可能产生的新成分。

4.全食品安全性评价

大鼠90天喂养试验资料。必要时提供大鼠慢性毒性试验和生殖毒性试验及其他动物喂养试验资料。

5.营养学评价

如果转基因植物在营养、生理作用等方面有改变的,应提供营养学评价资料。

(1)提供动物体内主要营养素的吸收利用资料。

(2)提供人群营养素摄入水平的资料以及最大可能摄入水平对人群膳食模式影响评估的资料。

6.生产加工对安全性影响的评价

应提供与非转基因对照物相比,生产加工、储存过程是否可改变转基因植物产品特性的资料,包括加工过程对转入DNA和蛋白质的降解、消除、变性等影响的资料,如油的提取和精炼、微生物发酵、转基因植物产品的加工、储藏等对植物中表达蛋白含量的影响。

7.按个案分析的原则需要进行的其它安全性评价

对关键成分有明显改变的转基因植物,需提供其改变对食用安全性和营养学评价资料。

对耐除草剂的转基因植物,需提供目标除草剂残留量的评价资料。

阶段要求

申请实验研究

本次新规未作具体规定,我们理解,需参照《转基因植物安全评价指南》进行

1.外源基因:包括目的基因、标记基因、报告基因以及启动子、终止子和其他调控序列。外源基因名称应当是按国际通行规则正式命名的名称或Genbank中的序列号,未正式命名或无Genbank序列号的应提供基因序列。

2.转基因性状:包括产量性状改良、品质性状改良、生理性状改良、杂种优势改良、抗逆、抗病、抗虫、耐除草剂、生物反应器、其他十种类型。

产量性状改良:指改良株高、株型、籽粒数量、籽粒大小、棉铃数量等。

品质性状改良:指改良淀粉成分、蛋白成分、微量元素含量、硫甙含量、芥酸含量、饱和脂肪酸含量、纤维品质、含油量等。

生理性状改良:指改良生育期、光合效率、营养物质利用率、种子储藏活力、根系活力等。

杂种优势改良:指雄性不育、育性恢复以及改良育性恢复能力等。

抗逆:指改良抗旱性、耐涝性、耐寒性、耐盐性等。

3.实验转基因植物材料数量:一份申报书中只能包含同一物种的受体生物和相同的转基因性状。

4.实验年限:一般为一至两年。

申请中间试验

1.提供靶基因和基因编辑方法的相关资料。

2.提供每一个基因编辑材料自交或杂交代别,及靶基因变化情况的数据资料。

3.提供载体序列PCR检测的资料。

4.提供脱靶情况的生物信息学分析资料。

1.提供外源插入序列的分子特征资料。

2.提供每一个转化体的转基因植株自交或杂交代别,及相应代别目的基因和标记基因PCR检测或转化体特异性PCR检测的资料。

3.按《转基因植物及其产品食用安全性评价导则》(NY/T1101 -2006)提供受体植物、基因供体生物的安全性评价资料。

4.提供新表达蛋白质的分子和生化特征等信息,以及提供新表达蛋白质与已知毒蛋白质、抗营养因子和致敏原氨基酸序列相似性比较的资料。

5.提供抗虫植物表达蛋白质和已商业化种植的转基因抗虫植物对靶标害虫作用机制的分析资料,评估交互抗性的风险。

申请环境释放和(或)生产性试验

申请环境释放或生产性试验

1)申请中间试验提供的相关资料,以及中间试验结果的总结报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物至少2代的遗传稳定性资料,包括靶基因编辑的稳定性和目标性状表现的稳定性。

4)提供目标性状和功能效率的评价资料。

5)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

6)提供环境安全评价和食用安全评价试验方案。

申请环境释放和生产性试验

(一)申请环境释放

1.申请中间试验提供的相关资料,以及中间试验结果的总结报告。

2.提供每个转基因株系中目的基因和标记基因整合进植物基因组的Southern杂交图和插入拷贝数,或提供每个转基因株系转化体特异性PCR检测图,并注明转基因株系的代别和编号。

3.提供目的基因在转录水平或翻译水平表达的资料。

4.提供转基因株系遗传稳定性的资料,包括目的基因和标记基因整合的稳定性、表达的稳定性和表型性状的稳定性。

5.对于抗病虫转基因植物,提供目标蛋白的测定方法,植物不同发育阶段目标蛋白在各器官中的含量,以及对靶标生物的田间抗性效率。

6.新蛋白质(包括目的基因和标记基因所表达的蛋白质)在植物食用和饲用部位表达含量的资料。

7.提供靶标害虫对新抗虫植物和已商业化种植的抗虫植物交互抗性的研究资料。

8.提供对可能影响的非靶标生物(至少1种非靶标植食性生物和2种有益生物)的室内生物测定资料。

9.提供目标性状和功能效率的评价资料。如,抗虫植物应明确靶标生物种类并提供室内或田间生测报告。

(二)申请生产性试验

分为两种类型,一是转化体申请生产性试验,二是用取得农业转基因生物安全证书的转化体与常规品种杂交获得的衍生品系申请生产性试验。

申请安全证书

类型1

生产应用

1)汇总以往各试验阶段的资料,提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物至少3代的遗传稳定性资料,包括靶基因编辑的稳定性和目标性状表现的稳定性。

3)提供目标性状和功能效率的评价资料。

4)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

5)提供环境安全评价和食用安全评价数据资料。

1.转化体申请安全证书

1)汇总以往各试验阶段的资料,提供环境安全和食用安全综合评价报告。

2)提供外源插入序列整合进植物基因组的资料。包括能明确外源片段(如转化载体骨架、目的基因和标记基因等)整合拷贝数并具有转化体特异性的分子杂交图谱,整合进植物基因组的外源片段的全长DNA序列和插入位点两端的边界序列,以及转化体特异性PCR检测图等。

3)提供该转化体至少3代的遗传稳定性资料,包括目的基因整合的遗传稳定性、表达的稳定性和表现性状的稳定性。

4)提供该转化体个体生存竞争能力、自然延续或建立种群能力的资料。

5)提供该转基因植物基因漂移的资料。

6)提供至少2代对目标性状和功能效率的田间评价资料。

7)提供对至少6种非靶标生物影响的评价资料。

8)提供至少2代对生物多样性影响的评价资料,以及对生态系统群落结构和有害生物地位演化影响的风险评估报告。

9)提供靶标生物对转基因植物所产生抗病/虫物质的敏感性基线资料,抗性风险评估的依据和结论;拟釆取的靶标生物综合治理策略、抗性监测方案和治理措施等。

10)提供完整的毒性、致敏性、营养成分、抗营养因子、耐除草剂作物目标除草剂的残留量等食用安全资料。

11)提供农业转基因生物技术检测机构出具的检测报告,包括:转化体的分子特征;目标性状功能效率评价、对非靶标生物的影响;新表达蛋白质与已知毒蛋白质、抗营养因子和致敏原氨基酸序列相似性比较;急性毒性试验、营养成分分析、大鼠90天喂养等。

12)如为续申请,则需要提供上次批准期限内的商业化种植数据和环境影响监测报告。

2.取得农业转基因生物安全证书的转化体与常规品种杂交获得的衍生品系申请安全证书

1)申请生产性试验提供的相关资料,以及生产性试验的总结报告。

2)提供亲本名称及其选育过程的资料。

3)提供外源插入序列整合进植物基因组的资料。包括能明确外源片段(如转化载体骨架、目的基因和标记基因等)整合拷贝数并具有转化体特异性的分子杂交图谱,整合进植物基因组的外源片段的全长DNA序列和插入位点两端的边界序列,或转化体特异性PCR检测图等。

4)提供目的基因和标记基因翻译水平表达的资料,或目标基因(被RNAi等方法所干涉的基因)在转录水平或翻译水平表达的资料。

5)提供遗传稳定性的资料,包括目的基因整合的稳定性、表达的稳定性和表现性状的稳定性。

6)提供目标性状和功能效率的评价资料。如,抗虫植物应提供靶标生物在转基因植物及受体植物田季节性发生危害情况和种群动态的试验数据。

7)如为续申请,则需要提供上次批准期限内的商业化种植数据和环境影响监测报告。

类型2

进口用作加工原料

1)提供安全评价综合报告。

2)提供基因编辑植物分子特征的资料,包括靶基因编辑情况、载体序列残留情况以及脱靶情况。

3)提供基因编辑植物的特异性检测数据。

4)提供环境安全评价和食用安全评价数据资料。

5)输出国家或者地区经过科学试验证明对人类、动植物、微生物和生态环境无害的资料。

1)提供所申报转基因植物样品、对照样品及检测方法。样品要求:种子(单一纯合体的,纯度大于99%);方法要求:提供外源插入序列信息及转化体特异性核酸检测方法等。

2)提供环境安全和食用安全综合评价报告。

3)农业转基因生物技术检测机构出具的环境安全和食用安全检测报告,环境安全检测报告一般包括确认转化体身份的核酸检测、生存竞争能力、基因漂移的环境影响、对非靶标生物和生物多样性影响的评价资料等;食用安全检测报告一般包括确认转化体身份的核酸检测、抗营养因子分析、全食品安全性评价(大鼠90天喂养试验)等。对于新性状、新类型的转基因植物的检测内容根据个案原则确定。

4)提供外源插入序列整合进植物基因组的资料。包括能明确外源片段(如转化载体骨架、目的基因和标记基因等)整合拷贝数并具有转化体特异性的分子杂交图谱,整合进植物基因组的外源片段的全长DNA序列和插入位点两端的边界序列,以及转化体特异性PCR检测图等。

5)提供完整的毒性、致敏性、营养成分、抗营养因子、耐除草剂作物目标除草剂的残留量等食用安全资料。

6)输出国家或者地区经过科学试验证明对人类、动植物、微生物和生态环境无害的资料。

 



[版权声明] 沪ICP备17030485号-1 

沪公网安备 31010402007129号

技术服务:上海同道信息技术有限公司   

     技术电话:400-052-9602(9:00-11:30,13:30-17:30)

 邮箱 :support@homolo.com

上海市律师协会版权所有 ©2000-2017